Нерациональное питание, малоподвижность, стрессовые ситуации способствуют развитию атеросклероза. В связи с этим коррекция образа жизни, в том числе изменение рациона питания, позволит снизить риск возникновения данного заболевания [1]. В рационах здорового питания большое значение уделяется включению пищевых продуктов - источников полноценного белка, содержащих пониженное количество холестерина.
Считалось, что основным путем превращения холестерина в организме человека является его окисление в процессах энергетического обмена до желчных кислот. Однако холестерин и его производные могут быть использованы в процессах пластического обмена микрофлоры желудочно-кишечного тракта [2].
Катаболизм холестерина до различных продуктов, которые утрачивают негативные свойства холестерина, способен осуществляться ферментными системами микроорганизмов. Количественный и качественный состав микроорганизмов влияет на скорость и глубину микробной трансформации холестерина, причем некоторые бактерии, благодаря своим ферментным системам, обладают способностью полностью деградировать холестерин. Кроме того, бактерии способны вызывать деструкцию и трансформацию желчных кислот, изменение концентрации которых индуцирует или ингибирует синтез холестерина. Так, при исследовании около 5000 штаммов E. coli было установлено, что холестеринразрушающей способностью обладали 40% бактерий, холестеринмодифицирующей -28%, холестеринсинтезирующей - 32% штаммов [3].
Микроорганизмы, связывающие холестерин, сорбируют различные жирные кислоты (пальмитиновую, олеиновую и др.). Многие бактерии способны ассимилировать холестерин в присутствии желчи при более низких рН среды (<6,0) [2, 4, 5]. При изучении данных свойств штаммов Lactobacillus fermentum из сыра Тулум были отобраны 7 штаммов L. fermentum, уровень ассимиляции холестерина которыми колебался между 12,1 и 45,3% в среде MRS и 20,7-71,1% в среде MRS с желчью [6].
Известно о холестериндеградирующей активности штаммов для кисломолочных продуктов. В 1995 г. было высказано предположение, что деконъюгация желчных кислот пробиотическими бактериями и ассимиляция холестерина лактобациллами и бифидобактериями вносят вклад в гипохолестеринемический эффект кисломолочных продуктов [7].
При оценке потенциальных пробиотических свойств 17 штаммов ацидофильных лактобактерий Lactobacillus gasseri спектрофотометрическим методом было установлено, что L. gasseri 4/13 снижал концентрацию холестерина в среде роста на 65% по сравнению с исходной концентрацией [8].
Было показано, что при развитии пробиотических бактерий, используемых при производстве кисломолочных продуктов, в питательной среде штаммы проявили различную способность к редукции холестерина. Установлено, что штаммы B. bifidum GG-72, B. adolescentis BGV-11 проявляли наибольшую активность к снижению уровня холестерина: 37,6 и 33,6% соответственно. Близкие по значению результаты показали штаммы L. plantarum ГВИ-1, L. fermentum LFM-2 и L. rhamnosus LC-52GV: 30,6, 29,6 и 27,1% соответственно, которые также проявляли способность к редукции холестерина [9].
Мясные продукты занимают значительную долю в повседневном рационе питания людей. Содержание холестерина в мясе и мясных продуктах варьирует в широких пределах: от 40 до 2300 мг/100 г. Достаточно высоко содержание холестерина в вареных колбасных изделиях - около 80 мг на 100 г изделия, а в сырокопченой колбасе холестерина содержится около 110 мг/100 г [10].
Известно, что в технологии ферментированных мясных продуктов обязательным условием для придания продукту требуемых характеристик, сокращения времени созревания, увеличения выхода готового продукта, продления сроков его хранения и повышения микробиологической безопасности является введение в рецептуру стартовых культур [11-13]. К промышленно ценным свойствам стартовых культур относятся сбраживание углеводов с образованием молочной кислоты, солеустойчивость, способность к денитрификации, антагонистическая активность по отношению к санитарно-показательной микрофлоре, синтез бактериоцинов и антибиотикоподобных соединений, способность к липолизу, протеолизу и образованию вкусоароматических соединений, способность утилизировать кислород и его активные формы за счет выделения таких ферментов, как каталаза, пероксидаза и супероксиддисмутаза, снижение уровня нежелательных соединений (токсинов, биогенных аминов, D(-)-молочной кислоты) [13].
В мясной промышленности широко используют различные бактериальные препараты, включающие несколько штаммов разных таксономических групп [13, 14]. Поэтому особый интерес представляет изучение способности снижать холестерин именно композицией стартовых культур. В связи с этим создание композиций стартовых культур, способных снижать уровень холестерина, и изучение их влияния на редукцию холестерина in vitro и в натуральном мясном продукте актуально и перспективно.
В задачи данного исследования входила оценка антагонистического эффекта штаммов, входящих в состав композиции, выбор наиболее эффективной in vitro бактериальной композиции, способной снижать холестерин, и апробация ее в процессе ферментации мясного сырья при производстве сырокопченых колбас.
Материал и методы
Для создания бактериальной композиции, состоящей из стартовых культур разных таксономических групп, необходимо изучить способность микроорганизмов к совместному росту и размножению. Характер взаимоотношения таких культур определяли методом перпендикулярных штрихов [15]. Бактериологической петлей один из изучаемых штаммов высевали по диаметру чашки Петри на плотную (агаризованную) среду MRS, специально предназначенную для культивирования молочнокислых микроорганизмов, затем перпендикулярно ему высевали другие штаммы. Культивирование проводили при 37 °С в течение 24 ч. В случае обнаружения антагонизма у культур микроорганизмов на стыке штрихов видна зона подавления роста.
Молочнокислые и другие микроорганизмы из коллекции ФГБОУ ВО "Московский государственный университет пищевых производств" для оценки холестеринредуцирующей активности выращивали в течение 24 ч в жидкой питательной среде MRS с добавлением холестерина (холестерин LS для биохимии, 95% основного вещества, Panreac) конечной концентрации 70 мг на 100 см3. Посевная доза микроорганизмов, определяемая с помощью оптического стандарта мутности Мак-Фарланда, для всех штаммов составляла 108 КОЕ/см3, конечная концентрация после 24 ч инкубации - 3х109 КОЕ/см3. Поскольку холестерин в чистом виде нерастворим в воде, его растворяли при нагревании в смеси 99% этанола и Твина-80 в соотношении 3:1 до концентрации в растворе 3 мг на 1 см3.
Определение концентрации холестерина в культуральной жидкости проводили спектрофотометрически при длине волны 560 нм по методу Златкиса-Зака. В ходе исследования использовали 3 показателя оптической плотности: питательный бульон (холостая проба); питательный бульон с холестерином и Твином-80 (контроль); питательный бульон с холестерином после культивирования в ней микробных культур и освобожденная от клеток центрифугированием (опытные пробы). Снижение концентрации холестерина (в %) вычисляли по формуле Златкиса-Зака [16].
Метод определения основан на реакции холестерина с FeCl3 в присутствии концентрированной серной и ледяной уксусной кислот с образованием комплекса желтого цвета. Пробу объемом 0,1 см3 растворяли в 3,0 см3 ледяной уксусной кислоты, после чего добавляли 2,0 см3 цветного реагента (10% раствор хлорида железа (III) в 100% ледяной уксусной кислоте, разведенный в 100 раз концентрированной серной кислотой) и аккуратно перемешивали, избегая образования пузырьков. Полученные растворы охлаждали при комнатной температуре и проводили измерение экстинкции опытных проб против контрольной (без содержания холестерина) при длине волны 560 нм в кюветах с длиной оптического пути 1 см. В качестве нулевой точки брали пробу, содержащую только холестерин, без добавления исследуемых культур.
Содержание холестерина (D, %) в исследуемых пробах рассчитывали по формуле:
где Еоп - экстинкция опытной пробы, единицы оптической плотности; Енул - экстинкция нулевой пробы, единицы оптической плотности.
Поскольку в мясе холестерин главным образом локализован в клеточных мембранах и находится в свободном, неэтерифицированном виде, в эксперименте использовали холестерин в виде раствора химически чистого вещества.
Для исследования влияния бактериальной композиции на содержание холестерина были выработаны образцы сырокопченой колбасы (опытный - с внесением выбранной бактериальной композиции, контрольный -без стартовых культур) по традиционной технологии. Сырокопченая колбаса была выработана из говядины и свиного шпика в соответствии с рецептурой, представленной в табл. 1.
Физико-химические показатели опытного и контрольного образцов готового продукта достоверно не различались, микробиологические показатели соответствовали требованиям ТР ТС 021/2011.
В готовых продуктах было определено содержание холестерина методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с использованием хроматографической системы ("Knauer", Германия) со спектрофотометрическим детектором K-2500 и программного обеспечения "Мультихром" (ООО "Амперсенд", РФ).
Эксперименты по влиянию бактериальных композиций стартовых культур на деструкцию холестерина in vitro, а также оценку уровня холестерина в образцах сырокопченых колбас проводили в 3 повторностях. Статистическую обработку результатов проводили на основе нормального распределения.
Результаты и обсуждение
При разработке бактериальной композиции были отобраны микроорганизмы с известными технологическими свойствами, прежде всего по:
- способности к быстрому и контролируемому снижению уровня рН (Lactobacillus curvatus 1, Lactobacillus sakei 35, Lactobacillus plantarum 19, Pediococcus pentosaceus 31, Pediococcus pentosaceus 28);
- наличию ферментов для безопасного образования окраски с помощью нитритредуктазы (Staphylococcus xylosus 45, Staphylococcus carnosus 108, Staphylococcus carnosus 111-2);
- наличию ферментов для защиты липидов от окисления каталазы и пероксидазы (Staphylococcus xylosus 45, Staphylococcus carnosus108, Staphylococcus carnosus 111-2), супероксиддисмутазы (Lactobacillus curvatus 1, Lactobacillus sakei 104, Lactobacillus sakei 105, Lactobacillus sakei 35, Lactobacillus plantarum 19, Lactobacillu casei 10, Staphylococcus xylosus 45, Staphylococcus carnosus 108, Staphylococcus carnosus 111-2);
- способности к формированию вкуса и аромата за счет определенных метаболитов стартовых культур, в том числе синтеза фермента глутаматдегидрогеназы (Lactobacillus plantarum 19, Lactobacillus sakei 35, Lactobacillus sakei 104, Staphylococcus carnosus 111-2);
- наличию бактериоцинов, способствующих стойкости продукта при хранении и подавляющих рост санитарно-показательной микрофлоры (Lactobacillus sakei 104, Lactobacillus sakei 105, Lactobacillus plantarum 19, Staphylococcus carnosus 108, Staphylococcus carnosus 111-2, Pediococcus pentosaceus 28) [13].
Также учитывали способность снижать содержание холестерина в питательной среде in vitro, определенную нами ранее у 43 штаммов [17]. Редукция холестерина составила: для 5 штаммов Lactobacillus curvatus - 9,232,0%; 7 штаммов Lactobacillus sakei - 8,9-21,1%; штамма Lactobacillus casei - 18,5%; 7 штаммов Lactobacillus plantarum - 11,8-24,3%; 8 штаммов Pediococcus acidilactici - 5,0-16,9%; 5 штаммов Pediococcus pentosaceus - 0-22%; 5 штаммов Staphylococcus carnosus -0-25,7%; 2 штаммов Staphylococcus xylosus - 17,2- 27,6%. Данное исследование подтвердило предположение, что способность снижать холестерин является штаммоспецифичным признаком микроорганизмов.
Из штаммов, способных снижать холестерин in vitro, были сформированы 6 бактериальных композиций, содержащих по 3 штамма каждая (табл. 2). В состав композиции входили микроорганизмы, относящиеся к трем родам: Lactobacillus, Pediococcus и Staphylococcus. В каждую композицию входил денитрифицирующий стафилококк, способный эффективно восстанавливать в колбасном фарше нитрит натрия до оксида азота; педиококк, синтезирующий бактериоцины, подавляющие рост санитарно-показательной микрофлоры; микроорганизм рода Lactobacillus, активно синтезирующий молочную кислоту для быстрого и контролируемого снижения уровня рН [13].
Штаммы, входящие в бактериальную композицию, должны обладать взаимной совместимостью. При определении возможности совместного использования стартовых культур методом перпендикулярных штрихов не отмечено антагонистического эффекта между штаммами, поэтому они могут использоваться совместно в качестве стартовых культур.
В исследованиях in vitro питательная среда MRS содержала 70 мг на 100 см3 холестерина. Установлено, что композиции проявляют большую способность к редукции холестерина, чем штаммы в монокультуре. Выявлен значительный синергетический эффект в редукции холестерина штаммами стартовых культур, вошедших в состав композиций a, b, с, d, f. Снижение холестерина отмечено на уровне (в %): 45,7±0,4, 41,3±0,5, 42,5±0,4, 38,7±0,35, 25±0,6, 31,5±0,3 от его исходного содержания в среде для композиций a, b, c, d, e, f соответственно. В то же время необходимо отметить, что в тех композициях, в которые входили штаммы с высокой способностью к снижению холестерина, общая способность к редукции холестерина также была выше (см. рисунок).
Полученные данные позволяют сделать заключение, что композиции из стартовых культур в большей степени редуцировали холестерин по сравнению со штаммами в монокультуре. По-видимому, такое благоприятное сосуществование микроорганизмов позволило усилить их физиологические функции, что привело к более быстрому воздействию на холестерин в питательной среде.
Погрешность измерений составляет 10% от истинного значения с вероятностью 0,9.
Это подтверждает данные, полученные ранее нами с соавторами, что консорциумы, используемые при производстве кисломолочных продуктов, проявляют большую способность к редукции холестерина, чем монокультуры. Консорциум, включающий, кроме штаммов Lactobacillus, штамм B. bifidum GG-72, редуцировал холестерин на уровне 47,6%, тогда как консорциум с теми же штаммами лактобактерий и со штаммом B. adolescentis BGV-11 снижал уровень холестерина на 40,2% от его исходного содержания в среде [9].
Для производства сырокопченой колбасы была выбрана композиция а: Lactobacillus sakei 105, Pediococcus pentosaceus 31, Staphylococcus xylosus 45 в соотношении 1:1:1. Бактериальную композицию, которая показала наибольшее снижение холестерина in vitro, вносили в мясное сырье на стадии фаршесоставления из расчета 109 КОЕ/г фарша.
Штамм Lactobacillus curvatus 1 обладает быстрым кислотообразованием, инактивирует активные формы кислорода и связывает ионы металлов переменной валентности в условиях in vitro [13, 18].
Staphylococcus carnosus 108 является денитрифицирующим штаммом, восстанавливающим нитрит натрия до окиси азота как в условиях in vitro, так и в мясном продукте [13]. Оксид азота является токсичным соединением для бактерий рода Clostridium и Listeria, которые имеют низкую концентрацию ферментов, участвующих в метаболизме нитрита [19]. Группой ученых было показано, что оксид азота в 125 раз более эффективно действует на данные бактерии, чем сам нитрит натрия [20].
Pediococcus pentosaceus 28, Lactobacillus plantarum 19 продуцируют бактериоцины, подавляющие рост представителей санитарно-показательной микрофлоры, что показано в исследованиях in vitro [13].
Содержание холестерина в исходном фарше составило 840±10 мг/кг. При изучении содержания холестерина в готовых колбасных изделиях наибольшее его количество было выявлено в контрольном образце и составило 971±15 мг/кг. Увеличение содержания холестерина, по-видимому, обусловлено испарением влаги и потерей массы продукта в результате сушки. В опытном образце с добавлением бактериальной композиции содержание холестерина снизилось на 21,4% (763±12 мг/кг), до уровня ниже, чем в контрольном образце. Необходимо отметить, что степень снижения холестеринав продукте была ниже, чем в питательной среде, более чем в 2 раза, однако и исходный уровень холестерина в фарше был ниже в 10 раз по сравнению с величиной опыта in vitro.
Таким образом, внесение композиции стартовых культур позволило снизить содержание холестерина в продукте за счет ферментативной активности микроорганизмов. Продолжительность процесса ферментации положительно коррелирует со степенью редукции холестерина, однако в данном исследовании образцы сырокопченой колбасы были выработаны по традиционной технологии с соблюдением технологических сроков, и результаты получены по окончании технологического процесса.
Полученные экспериментальные данные по влиянию бактериальных стартовых культур на содержание холестерина in vitro и в пищевом продукте согласуются с результатами исследований зарубежных авторов. В работе R. Azat штамм L. rhamnosus R4 из традиционного ферментированного сыра Синьцзян продемонстрировал деградацию холестерина и триглицеридов на 50,97 и 28,92% соответственно [21]. В другом исследовании 9 из 122 штаммов Enterococcus faecium, выделенных из традиционного домашнего сыра Тафи, были способны удалять холестерин в анализах in vitro [22]. В 2015 г. штаммы дрожжей из некоторых зерновых культур на основе нигерийских традиционных ферментированных пищевых продуктов Pichia kluyveri LKC17, Issatchenkia orientalis OSL11, Pichia kudriavzevii OG32, Pichia kudriavzevii ROM11 и Candida tropicalis BOM21 снижали содержание холестеринана на 49,03-74,05% в течение 48 ч [23]. В исследовании 2013 г. 3 штамма лактобактерий Lactobacillus acidophilus La15, Lactobacillus plantarum B23 и Lactobacillus kefiri D17, выделенные из тибетских кефирных зерен, показали потенциальную активность гидролазы солей желчной кислоты, способности к ассимиляции и копреципитации холестерина [24]. Была показана способность культуры Pediococcus pentosaceus CFR R123 из зерновых и бобовых традиционных ферментированных продуктов снижать содержание холестерина [25]. Были изучены эффекты закваски кимчи на основе Leuconostoc kimchii GJ2 на снижение уровня холестерина in vitro и у крыс, получавших диету с высоким содержанием жиров и высоким содержанием холестерина. Показан высокий уровень ассимиляции холестерина in vitro клетками Leuconostoc kimchii GJ2. При добавлении в рацион закваски кимчи у крыс значительно снижался уровень общего холестерина, триглицеридов и липополисахаридов низкой плотности в крови, печени и жировой ткани придатков яичек, а также индекс атерогенности и кардиальный фактор риска [26].
Данные литературы о снижении холестерина в основном относятся к стартовым культурам в составе кисломолочных и растительных продуктов. Публикаций по изучению потенциала стартовых культур и их композиций снижать холестерин в мясных изделиях не найдено, что еще раз подтверждает актуальность выбранного направления исследования.
Заключение
Анализ собственных исследований и данных литературы позволил сделать вывод, что снижение холестерина in vitro стартовыми культурами является штаммоспецифичным признаком.
С учетом промышленно-ценных свойств стартовых культур, отсутствия антагонизма между штаммами, а также их способности редуцировать холестерин in vitro предложены 6 бактериальных композиций.
Выявлен синергетический эффект в редукции холестерина штаммами стартовых культур, объединенных в композицию, в питательной среде, содержащей добавленный холестерин (70 мг на 100 см3) в среднем на 16,5% по сравнению со штаммами в монокультуре. Снижение холестерина составило 25,0-45,7%.
Для производства сырокопченой колбасы выбрана композиция стартовых культур Lactobacillus sakei 105, Pediococcus pentosaceus 31 и Staphylococcus xylosus 45 с максимальной способностью снижать холестерин in vitro - 45,7±0,4%.
Полученные результаты показали возможность использования бактериальных композиций стартовых культур для снижения уровня холестерина в ферментированных мясных продуктах, в частности сырокопченых колбасах. Для опытного образца продукта с добавлением бактериальной композиции содержание холестерина снизилось на 21,4% по сравнению с контрольным, но в 2 раза меньше, чем in vitro в питательной среде.
Исследования выполнены в рамках госконтракта № 40.2511.2014/К.
Литература
1. Millan J. Lipoprotein ratios: Physiological significance and clinical usefulness in cardiovascular prevention // Vasc. Health Risk Manag. 2009. Vol. 5. P. 757-765.
2. Barona J., Fernandez M.L. Dietary cholesterol affects plasma lipid levels, the intravascular processing of lipoproteins and reverse cholesterol transport without increasing the risk for heart disease // Nutrients. 2012. Vol. 4, N 8. P. 1015-1025.
3. Петухов В.А., Стернина Л.А., Травкин А.Е. Нарушения функций печени и дисбиоз при липидномдистресс-синдроме Савельева: современный взгляд на проблему // Consilium Medicum. 2004. Т. 6, № 6. С. 406-409.
4. Saarela M. et al. Probiotic bacteria: safety, functional and technological properties // J. Biotechnol. 2000. Vol. 84, N 3. P. 197-215.
5. Kumari A., Catanzaro R., Marotta F. Clinical importance of lactic acid bacteria: a short review // Acta Biomed. 2011. Vol. 82, N 3. P. 177-180.
6. Tulumoglu S., Kaya H.I., Simsek O. Probiotic characteristics of Lactobacillus fermentum strains isolated from Tulum cheese // Anaerobe. 2014. Vol. 30. P. 120-125.
7. Perez Chaia A., Strasser de Saad A.M., de Ruiz Holgado A.P., Oliver G. Short-chain fatty acids modulate growth of lactobacilli in mixed culture fermentations with propionibacteria // Int. J. Food Microbiol. 1995. Vol. 26, N 3. P. 365-374.
8. Baltova K., Dimitrov Z. Probiotic and cultural characteristic of strain Lactobacillus gasseri 4/13 of human origin // Biotechnol. Biotechnol. Equip. 2014. Vol. 28, N 6. P. 1084-1088.
9. Головин М.А., Ганина В.И., Машенцева Н.Г. Холестеринредуцирующие пробиотические бактерии в молочной продукции // Мол. пром-сть. 2014. № 5. С. 46-47.
10. Покровский А.А. Книга о вкусной и здоровой пище. 8-е изд., исправ. и доп. М. : Агропромиздат, 1988. 368 с.
11. Erkkila S. Bioprotective and probiotic meat starter cultures for the fermentation of dry sausages. Diss. Helsinki, 2001. 64 р.
12. Leroy F., Verluyten J., De Vuyst L. Functional meat starter cultures for improved sausage fermentation // Int. J. Food Microbiol. 2006. Vol. 106, N 3. P. 270-285.
13. Машенцева Н.Г., Хорольский В.В. Функциональные стартовые культуры в мясной промышленности. М. : ДеЛи принт, 2008. 335 с.
14. Лисицын А.Б., Липатов Н.Н., Кудряшов Л.С., Алексахина В.А. Производство мясной продукции на основе биотехнологии / под общ. ред. Н.Н. Липатова. М. : ВНИИМП, 2005. 369 c.
15. Система предрегистрационного доклинического изучения безопасности препаратов. Отбор, проверка и хранение производственных штаммов, используемых при производстве пробиотиков : методические указания. М. : Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2010. 60 с.
16. Zlatkis A., Zak B., Boyle A.J. A new method for the direct determination of serum cholesterol // J. Lab. Clin. Med. 1953. Vol. 41. P. 486-492.
17. Титов Е.И., Колотвина СВ., Машенцева Н.Г., Семёнышева А.И., Нгуен Т.М.К. Стартовые культуры, снижающие содержание холестерина, в мясных продуктах // Мясная индустрия. 2012. № 2. С. 22 25.
18. Messens W., Verluyten J., Leroy F., De Vuyst L. Modelling growth and bacteriocin production by Lactobacillus curvatus LTH 1174 in response to temperature and pH values used for European sausage fermentation processes // Int. J. Food Microbiol. 2003. Vol. 81, N 1. Р. 41-52.
19. Payne M.J., Woods L.F.J., Gibbs P., Cammack R. Electron paramagnetic resonance spectroscopic investigation of the inhibition of the phosphoroclastic system of Clostridium sporogenes by nitrite // J. Gen. Microbiol. 1990. Vol. 136. 2067-2076.
20. Cammack R., Joannou C.L., Cui X.-Y., Martinez C.T., Maraj S.R., Hughes M.N. Nitrite and nitrosyl compounds in food preservation // Biochim. Biophys. Acta. 1999. Vol. 1411, N 2-3. P. 475-488.
21. Azat R., Liu Y., Li W., Kayir A., Lin D.B., Zhou W.W. et al. Probiotic properties of lactic acid bacteria isolated from traditionally fermented Xinjiang cheese// J. Zhejiang Univ. Sci. B. 2016. Vol. 17, N 8. P. 597-609.
22. Saavedra L., Taranto MP., Sesma F., de Valdez G.F. Homemade traditional cheeses for the isolation of probiotic Enterococcus faecium strains // Int. J. Food Microbiol. 2003. Vol. 88, N 2-3. P. 241-245.
23. Ogunremi O.R., Sanni A.I., Agrawal R. Probiotic potentials of yeasts isolated from some cereal-based Nigerian traditional fermented food products // J. Appl. Microbiol. 2015. Vol. 119, N 3. P. 797-808.
24. Zheng Y., Lu Y., Wang J., Yang L., Pan C., Huang Y. Probiotic properties of Lactobacillus strains isolated from Tibetan kefir grains // PLoS One. 2013. Vol. 8, N 7. Artivle ID e69868.
25. Raghavendra P., Rao T.S., Halami P.M. Evaluation of beneficial attributes for phytate-degrading Pediococcuspentosaceus CFR R123 // Benef. Microbes. 2010. Vol. 1, N 3. P. 259-264.
26. Jo S.Y., Choi E.A., Lee J.J., Chang H.C. Characterization of starter kimchi fermented with Leuconostockimchii GJ2 and its cholesterol-lowering effects in rats fed a high-fat and high-cholesterol diet // J. Sci. Food Agric. 2015. Vol. 95, N 13. P. 2750-2756.